Архив статей журнала
Гематологический анализ, или общий анализ крови, направленный на оценку качественного и количественного состава крови позволяет учитывать широкий спектр показателей. Это один из наиболее простых и часто используемых анализов, позволяющий осуществить мониторинг здоровья лабораторных животных, а также оценивать ход эксперимента. С его помощью можно получить характеристику всех форменных элементов крови: эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, оценить их процентное соотношение, форму и вид, обнаружить патологические формы клеток, клеток-предшественников или различные включения. Данный вид анализа может указать на ранние изменения состояния здоровья организма, определить такие состояния, как анемия/полицитемия, тромбоцитопения/тромбоцитоз и лейкопения/лейкоцитоз, которые могут быть симптомами какого-либо заболевания или выступать в качестве самостоятельных патологий. Именно поэтому в каждом научном центре необходимо иметь референтные интервалы гематологических показателей крови здоровых лабораторных животных, учитывающие критические преаналитические, аналитические и постаналитические особенности. Целью данной работы являлось установление референтных интервалов гематологических показателей крови как самцов, так и самок мышей, песчанок, хомяков, крыс, морских свинок и кроликов, как широко используемых тест-систем в биомедицинских исследованиях. Возраст всех животных соответствовал диапазону половой зрелости, в исследование были включены самцы и небеременные и нерожавшие самки без учета фазы менструального цикла. Данные, используемые в работе, были получены от интактных животных за временной период январь—июнь 2024 г. в АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ». Вся работа была поделена на два этапа: оценка показателей на гематологическом анализаторе и подсчет лейкоцитарной формулы в ходе микроскопического анализа. В цельной крови животных посредством гематологического анализатора регистрировали такие показатели, как общее число эритроцитов, гематокрит, концентрация гемоглобина, средний объем эритроцитов в общем объеме пробы, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средняя концентрация гемоглобина в эритроците, общее число тромбоцитов, общее число лейкоцитов, число лимфоцитов и гранулоцитов. При подсчете лейкоцитарной формулы регистрировались такие показатели, как содержание палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов, базофилов и лимфоцитов. При сравнении полученных интервалов с референтными значениями из источников литературы было показано, что в целом диапазоны рассматриваемых показателей схожи, но присутствуют и различия. Наибольшие различия были связаны с количеством эритроцитов, тромбоцитов, моноцитов, лимфоцитов, нейтрофилов и концентрацией гемоглобина. Референтные интервалы, рассчитанные в ходе исследования, могут быть полезным инструментом мониторинга состояния здоровья лабораторных животных в ходе проведения доклинических экспериментов.
Катехол-О-метилтрансфераза (KОМТ) является одним из основных ферментов млекопитающих, участвующих в метаболизме катехоламинов, таких как дофамин, норадреналин. Процесс метаболизма катехоламинов важен для регуляции нормального функционирования нервной системы, включая эмоции и реакции на стресс. Участие KОМТ в функционировании нервной системы делает животных с инактивированным геном comt удобной моделью для изучения психических расстройств. С помощью CRISPR/Cas9-технологии была создана новая линия мышей с нокаутом гена comt. Измерение концентрации нейромедиаторов и их метаболитов в стриатуме и префронтальной коре у мышей с нокаутом гена comt и мышей дикого типа проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием внутреннего стандарта 2,3-дигидроксибензойной кислоты, не встречающейся в нативной ткани, в концентрации 100 нг/мл. У гомозиготных мышей с нокаутом гена comt наблюдалось отсутствие гомованилиновой кислоты — конечного продукта метаболизма дофамина в префронтальной коре и стриатуме, в то время как уровень промежуточного продукта 3,4-дигидроксифенилуксусной кислоты был выше. Уровень норадреналина в префронтальной коре оказался выше, тогда как в стриатуме достоверных различий между нокаутными мышами и мышами дикого типа не обнаружено. Несмотря на соответствующие изменения в метаболитах катехоламинов, концентрации серотонина и дофамина значительно не различались между группами мышей с нокаутом гена comt и мышей дикого типа.